人獣共通感染症　第８１回
異種移植とブタ内在性レトロウイルス：異種移植の経験のある人での追跡研究の報告


霊長類フォーラム：人獣共通感染症（第８１回）8/21/99

　異種移植の臨床試験に向けて欧米では活発な議論が行われています。その中でもっ とも大きな問題としてとりあげられているのはブタ内在性レトロウイルスがブタの臓 器の移植を受けた患者に感染し、患者に癌、免疫不全など思いがけない病気を起こす ことはないか、さらにそのウイルスが患者の家族や医療従事者に感染を広げることは ないか、また最悪の場合には社会に広げることはないかといった議論です。

　ブタ内在性レトロウイルスはおそらく数百万年前にブタの染色体に組み込まれたも ので、ほとんどはウイルスの遺伝子の一部でいわばウイルスの化石のようなものです が、中には完全なウイルス遺伝子を保有していて感染性ウイルスを放出するものがあ ります。そのようなブタ内在性レトロウイルスとしてこれまでに７株が分離されてお り、エンベロープ遺伝子の構造から３つのタイプに分けられています。

　そのうちのあるものは試験管内で培養した人の細胞に感染を起こすことから人の身 体の中でも増殖する可能性があるという問題が提起されています。しかし、試験管内 の細胞での増殖が人の身体での増殖性を必ずしも証明するものではありません。ある ウイルスが人に感染するかどうかを知ることは、人で確かめるしか方法はありません 。といっても人への接種実験をするわけにはいきません。

　 　この問題へのアプローチとして考えられているのは、移植や体外潅流などの医療で ブタの臓器、組織、細胞にさらされたことのある人について、ブタ内在性レトロウイ ルス感染の有無を調べることです。すでにCDCのグループはスウェーデンでブタ胎児 の膵臓細胞の移植を受けた１０名の糖尿病患者について、またブタ内在性レトロウイ ルスの危険性を最初に細胞接種実験で指摘した英国のロビン・ワイスのグループはブ タの腎臓による体外潅流を受けた２名の腎臓透析患者について調べた結果、ブタ内在 性レトロウイルス感染の証拠が見いだせなかったことを報告しています。

　異種移植の開発の最先端にある英国のイムトラン社は親会社のノバルテイス社とと もに、同様にブタの臓器、組織、細胞にさらされたことのある１６０名という多数の 患者について大がかりな調査研究を行ってきました。

　この研究については丁度、１年前の本講座（第６５回）ですでにご紹介しました。 この大規模な研究の結果がまとまり８月２０日発行のサイエンス誌に発表されました 。その結果は１６０名でブタ内在性レトロウイルス感染の証拠はみいだせなかったと いうことで、朝日新聞８月２０日の夕刊にワシントン特派員の辻篤子記者（元アエラ 編集長）により簡単に紹介されています。この研究の結果について、もう少しくわし い内容を私なりにまとめてみようと思います。専門的すぎるところは飛ばして読んで いただいて結構です。

　サイエンスの論文はカズ・パラデイスKhazal Paradis（イムトラン社の臨床研究部 長）、が筆頭著者で、ほかにQ-One Biotech（英国にあるベンチャー）、Genetic The rapeutics Inc (GTI)、CDCの人たちが加わっています。Q-One Biotech とGTIはいず れもノバルテイス社の傘下です。GTIは遺伝子治療の最初のベンチャーで、北海道で 行われた遺伝子治療はここの協力で行われています。これらの研究機関はいずれもレ トロウイルス検出技術で最先端のところです。

　患者の内訳は脾臓の体外潅流１００名（ロシア）、皮膚移植１５名（ドイツ）、膵 臓細胞移植１４名（スウェーデン、ニュージーランド）、バイオ人工肝臓の体外潅流 ２８名（フランス、米国、イスラエル）、腎臓の体外還流２名（スウェーデン）、肝 臓の体外潅流１名（カナダ）、の計１６０名で文書によるインフォームド・コンセン トをとった後、血液と唾液が採取されました。これらの患者の背景については第６５ 回の講座でも簡単に触れていますので、参照してください。

　ブタ内在性レトロウイルス感染の証拠はウイルス遺伝子、ウイルス粒子、抗ウイル ス抗体の３つの面から調べています。ウイルス遺伝子はポリメラーゼ・チェーン反応 （PCR）によるウイルスDNA の検出、ウイルス粒子は逆転写ーPCRによるウイルスRNA の検出、抗体はウエスタン・ブロットでのgag蛋白に対する抗体の検出で行いまし た。

　ウイルスの検出感度は５０万個の細胞にウイルスDNA１コピーが検出できる、非常 に高い感度です。ここで問題になるのは、マイクロキメリズムです。これはブタの細 胞が人の血液の中に混在している状態、すなわち血液キメラです。なお、人の臓器移 植でもドナー由来の細胞によるマイクロキメリズムは起こります。もしもブタの細胞 にレトロウイルスが存在していると、人の細胞に感染していなくても、高い感度の検 査ではこのレトロウイルスも検出されてしまいます。したがってレトロウイルスが検 出された場合に、ブタの細胞の中のものか、人に感染したものかを区別することが必 要です。そのために、マイクロキメリズムがあるかどうか、すなわち血液中にブタの 細胞が存在しているかどうかをまず調べます。これにはブタの染色体のセントロメア のDNA配列とミトコンドリアDNA配列をPCRで調べ、もしもレトロウイルスDNAが検出さ れたならば、レトロウイルスDNAの量とミトコンドリアDNAの量の比を求めて、それが 通常のブタの場合と同じであればマイクロキメリズムによるレトロウイルスDNA、そ の比が有意に大きければ人細胞への感染とみなします。

　このような実験計画で調査を行った結果、１６０名のいずれにも感染の証拠はみら れませんでした。４名が抗体陽性でしたが、そのうちの２名は移植を受けた際の血清 が保存されていて、この時点ですでに陽性でした。ほかの２名は以前の血清が保存さ れていませんでしたが、ウイルスDNA、ウイルス粒子のいずれも陰性でした。おそら く以前から抗体があったか、無関係の抗原との交差反応によるものと判断されていま す。

　１６０名の中には薬剤による免疫抑制を受けていた人が３６名います。また２３名 ではマイクロキメリズム、すなわち血液中にブタの細胞の存在がみつかっています。 中には８年以上前に処置を受けた人も含まれています。これらの人を含めて、１６０ 名すべてが陰性という結果でした。

　この結果を受けてイムトラン社では十分な安全対策を考慮した限定的な臨床試験の 準備を開始するものと思われます。

Kazuya Yamanouchi （山内一也）


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